ДНК-полимераза Hotstart Taq (5 ед./мкл)
ДНК-полимераза Taq представляет собой ДНК-полимеразу с горячим стартом с двойным блокированием двойными антителами. Этот продукт не только блокирует 5'→3'-полимеразную активность ДНК-полимеразы Taq, но также блокирует 5'→3'-экзонуклеазную активность.Нагревание в течение 30 секунд при температуре предварительной денатурации может полностью инактивировать антитело и высвободить активность ДНК-полимеразы и экзонуклеазную активность.Характеристика двойного блокирования может не только эффективно предотвращать неспецифическую амплификацию, вызванную несоответствием или димером праймера, но также эффективно подавлять снижение сигнала флуоресценции, вызванное деградацией зонда, чтобы сделать реагент для обнаружения in vitro более стабильным во время транспортировки или использования в помещении. температура.
Компоненты
Компонент | HC1012Б (250У) | HC1012Б (1000Е) | HC1012Б (10000Е) | HC1012Б (25000УЕ) |
ДНК-полимераза Taq(5 Ед/мкл) | 50 мкл | 200 мкл | 2 мл | 5 мл |
Условия хранения
Продукт поставляется с сухим льдом и может храниться при температуре от -25°C до -15°C в течение 2 лет.
Технические характеристики
Полимераза | ДНК-полимераза Taq |
Чистота | ≥ 95% (SDS-PAGE) |
Горячий старт | Встроенный горячий старт |
Скорость реакции | Стандартный |
Экзонуклеазная активность | 5′→3′ |
инструкции
Настройка реакции
Компоненты | Объем (мкл) | Окончательная концентрация |
2× Буферa | 25 | 1× |
Смесь праймера и зондаб | × | 0,1 мкмоль/л-0,5 мкмоль/л |
Hotstart Taq-полимераза (5 ЕД/мкл) | 1.2 | 0,12 Ед/мкл |
Шаблон ДНКc | × | 0,1-100 нг |
ддх2O | До 50 | - |
Примечания:
1) В соответствии с конкретным экспериментальным применением необходимо приготовить соответствующий реакционный буфер.
2) Количество ДНК и концентрация зондов или праймеров являются рекомендуемыми концентрациями.Оптимальную концентрацию можно регулировать в соответствии с конкретными экспериментальными условиями.
Протокол термоциклирования
Шаг | Температура(°С) | Время | Циклы |
Предварительная денатурация | 95 ℃ | 5 минут | 1 |
Денатурация | 95 ℃ | 15 секунд | 45 |
Отжиг/Расширение | 60 ℃а | 30 секундb |
Примечания:
1) Температура реакции регулируется в соответствии со значением Tm разработанных праймеров.
2) Разным инструментам qPCR требуется разное время получения сигнала флуоресценции, пожалуйста, установите минимальное время.
Примечания
Пожалуйста, надевайте необходимые средства индивидуальной защиты, такие как лабораторный халат и перчатки, чтобы обеспечить свое здоровье и безопасность!