Образец реагента для высвобождения
Реагент для высвобождения образца предназначен для сценариев молекулярной диагностики POCT.Для двух систем прямой амплификации LAMP и прямой амплификации ПЦР нет необходимости в экстракции нуклеиновой кислоты.Неочищенный лизат образца может быть напрямую амплифицирован, целевой ген может быть точно обнаружен, время обнаружения образца может быть дополнительно сокращено, что идеально соответствует требованиям применения молекулярного POCT.Он подходит для мазков из носа, мазков из горла и других типов образцов.Обработанные образцы можно напрямую использовать для количественной флуоресцентной ПЦР в реальном времени или обнаружения LAMP, а те же результаты, что и традиционные методы экстракции, могут быть достигнуты без сложных операций экстракции нуклеиновых кислот.
Условия хранения
Транспортировать и хранить при комнатной температуре.
Контроль качества
Функциональное обнаружение – количественная кПЦР: была амплифицирована система реагентов для высвобождения образца объемом 800 мкл.
с 1000 копиями нового псевдовируса, одним образцом мазка из носа, что дает аналогичные кривые амплификации иЗначения ΔCt в пределах ±0,5 Ct.
Экспериментальная процедурарез
1. Возьмите 800 мкл реагента для высвобождения пробы и распределите лизирующий раствор в пробирку для отбора проб емкостью 1,5 мл.
2. Возьмите мазок из носа или мазок из горла с помощью тампона; Процедура взятия мазка из носа: возьмите стерильный тампон и поместите его в ноздри, медленно продвигайтесь на глубину около 1,5 см, осторожно вращайте 4 раза против слизистой оболочки носа в течение более 15 секунд. , затем повторите ту же операцию на другой полости носа тем же тампоном. Порядок взятия мазка из горла: возьмите стерильный тампон и аккуратно, быстро протрите глоточные миндалины и заднюю стенку глотки 3 раза.
3.Немедленно поместите тампон в пробирку для взятия проб.Головку тампона следует вращать и перемешивать в растворе для хранения не менее 30 секунд, чтобы обеспечить полное элюирование образца в пробирке для отбора проб.
4. Инкубация при комнатной температуре (20~25℃) в течение 1 минуты, подготовка лизирующего буфера завершена.
5. Как 25-мкл система RT-PCR, так и RT-LAMP были совместимы с добавлением 10 мкл матрицы для экспериментов по обнаружению.
Примечания
1. Минимальное количество прямого лизата образца, соответствующее одному тампону, может быть доведено до 400 мкл, что можно отрегулировать в соответствии с потребностями тестирования.
2. После того, как образец обработан реагентом для высвобождения образца, рекомендуется как можно скорее провести следующий этап теста, интервал ожидания предпочтительно составляет менее 1 часа.
3. pH лизата образца кислый, и система обнаружения должна иметь определенный буфер.Он подходит для большинства ПЦР, ОТ-ПЦР и обнаружения флуоресценции LAMP с pH-буфером, но не подходит для колориметрического обнаружения LAMP без буфера.
