Щелочная фосфатаза (ALP)
Описание
Щелочная фосфатаза получена из рекомбинантного штамма E. coli, несущего ген TAB5.Фермент катализирует дефосфорилирование 5'- и 3'-концов фосфомоноэфиров ДНК и РНК.Кроме того, он гидролизует рибозу, а также дезоксирибонуклеозидтрифосфаты (NTP и dNTP).Щелочная фосфатаза TAB5 действует на 5'-выступающие, 5'-утопленные и тупые концы.Фосфатаза может использоваться во многих приложениях молекулярной биологии, таких как клонирование или мечение концов зонда для удаления фосфорилированных концов ДНК или РНК.В экспериментах по клонированию дефосфорилирование предотвращает самолигирование линеаризованной плазмидной ДНК.Он также может разлагать невключенные dNTP в реакциях ПЦР с целью подготовки матрицы для секвенирования ДНК.Фермент полностью и необратимо инактивируется при нагревании при 70°C в течение 5 минут, что делает ненужным удаление фосфатазы перед лигированием или концевым мечением.
Применение
1. Щелочная фосфатаза, связанная с белками (антителами, стрептавидином и т. д.), может специфически идентифицировать молекулы-мишени и может использоваться в ИФА, ВБ и гистохимическом обнаружении;
2. Щелочную фосфатазу можно использовать для дефосфорации 5'-конца ДНК или РНК, чтобы предотвратить самосвязывание;
3. Вышеупомянутая дефосфорилированная ДНК или РНК может быть помечена радиоактивно мечеными фосфатами (посредством полинуклеотидкиназы Т4).
Химическая структура
Спецификация
| Тестовые задания | Технические характеристики |
| Ферментативная активность | 5Ед/мкл |
| Эндонуклеазная активность | Не обнаружен |
| Экзонуклеазная активность | Не обнаружен |
| Никинговая активность | Не обнаружен |
| РНКазная активность | Не обнаружен |
| ДНК кишечной палочки | ≤1 копия/5U |
| эндотоксин | LAL-тест, ≤10EU/мг |
| Чистота | ≥95% |
Транспортировка и хранение
Транспорт:Окружающий
Хранилище :Хранить при температуре 2–8°C.
Рекомендуется пройти повторный тестЖизнь:2 года
