ДНК-полимераза Bst 2.0 (без глицерина, высокая плотность)
ДНК-полимераза Bst V2 получена из ДНК-полимеразы I Bacillus stearothermophilus, которая обладает 5'→3' ДНК-полимеразной активностью и сильной активностью замены цепи, но не имеет экзонуклеазной активности 5'→3'.ДНК-полимераза Bst V2 идеально подходит для смещения цепи, изотермической амплификации LAMP (петлевая изотермическая амплификация) и быстрого секвенирования.Эта ДНК-полимераза Bst V2 способна ингибировать активность ДНК-полимеразы при комнатной температуре, поэтому ее можно использовать и составлять реакционную систему при комнатной температуре, предотвращая неспецифическую амплификацию и повышая эффективность реакции. быть лиофилизированным.Кроме того, он способен проявлять свою активность при повышенных температурах, что устраняет необходимость в отдельной стадии активации.
Компоненты
Компонент | ХК5007A-01 | ХК5007A-02 | ХК5007A-03 |
ДНК-полимераза Bst V2 (без глицерина) (32 ЕД/мкл) | 0,05 мл | 0,25 мл | 2,5 мл |
10 × буфер HC Bst V2 | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 3×10 мл |
MgSO4 (100 мМ) | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 2×10 мл |
Приложения
1.Изотермическое усиление LAMP
2.Реакция одиночного замещения цепи ДНК
3.Секвенирование генов с высоким содержанием GC
4.Секвенирование ДНК нанограммного уровня.
Условия хранения
Транспортировать при температуре 0°C и хранить при температуре -25°C~-15°C.
Определение единицы измерения
Одна единица определяется как количество фермента, которое включает 25 нмоль dNTP в нерастворимый в кислоте материал за 30 минут при 65°C.
Реакция ЛАМПЫ
Компоненты | 25 мклСистема |
10 × буфер HC Bst V2 | 2,5 мкл |
MgSO4 (100 мМ) | 1,5 мкл |
дНТФ (по 10 мМ каждый) | 3,5 мкл |
SYTO™ 16 Зеленый (25 ×)a | 1,0 мкл |
Праймерная смесьb | 6 мкл |
ДНК-полимераза Bst V2 (без глицерина) (32 ед/мкл) | 0,25 мкл |
Шаблон | × мкл |
ddH₂O | До 25 мкл |
Примечания:
1) а.SYTOTM 16 Green (25×): В зависимости от экспериментальных потребностей в качестве заменителей можно использовать другие красители;
2) б.Смесь праймеров: получена путем смешивания 20 мкМ FIP, 20 мкМ BIP, 2,5 мкМ F3, 2,5 мкМ B3, 5 мкМ LF, 5 мкМ LB и других объемов.
Реакция и состояние
1 × буфер HC Bst V2, температура инкубации от 60°C до 65°C.
Тепловая инактивация
80°С, 20 минут.