2×ПЦР Мастер-микс (без красителя)
PCR Master Mix — это своего рода традиционный готовый к использованию раствор для ПЦР, включающий ДНК-полимеразу Taq, смесь dNTP MgCl2 и оптимизированный буфер.Во время реакции для амплификации можно добавлять только праймер и матрицу, что значительно упрощает этапы эксперимента.Этот продукт содержит отличные стабилизаторы и может храниться в течение 3 месяцев при температуре 4 ℃.Продукт ПЦР имеет выступ 3'-dA и может быть легко клонирован в Т-вектор.
Условия хранения
Продукт следует хранить при температуре -25℃~-15℃ в течение двух лет.
Технические характеристики
| Верность (по сравнению с Taq) | 1× |
| Горячий старт | No |
| Свес | 3'-А |
| Полимераза | ДНК-полимераза Taq |
| Формат реакции | СуперМикс или Мастер Микс |
| Скорость реакции | Стандартный |
| Тип продукта | Мастер-микс ПЦР (2×) |
инструкции
1.Реакционная система
| Компоненты | Размер (мкл) |
| ДНК шаблона | Подходящий |
| Праймер 1 (10 мкмоль/л) | 2 |
| Праймер 2 (10 мкмоль/л) | 2 |
| Мастер-микс ПЦР | 25 |
| ддх2O | до 50 |
2.Протокол усиления
| Шаги цикла | Температура (°С) | Время | Циклы |
| Предварительная денатурация | 94 ℃ | 5 минут | 1 |
| Денатурация | 94 ℃ | 30 секунд | 35 |
| Отжиг | 50-60 ℃ | 30 секунд | |
| Расширение | 72 ℃ | 30-60сек/кб | |
| Окончательное продление | 72 ℃ | 10 минут | 1 |
Примечания:
1) Использование шаблона: 50-200 нг геномной ДНК;0,1-10 нг плазмидной ДНК.
2) Мг2+концентрация: Этот продукт содержит 3 мМ MgCl2, подходящего для большинства реакций ПЦР.
3) Температура отжига: см. теоретическое значение Tm праймеров.Температуру отжига можно установить на 2-5 ℃ ниже теоретического значения грунтовки.
4) Время расширения: для молекулярной идентификации рекомендуется 30 сек/кб.Для клонирования генов 60рекомендуется сек/КБ.
Примечания
1.Для вашей безопасности и здоровья при работе надевайте лабораторные халаты и одноразовые перчатки.
2.Только для исследовательских целей!
