Мультиплексный одношаговый премикс для RT-qPCR
Описание
Кат. номер: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix — это набор для мультиплексной количественной ПЦР на основе РНК в качестве матрицы.В эксперименте обратная транскрипция и количественная ПЦР выполняются в одной реакционной пробирке, что упрощает экспериментальную операцию и снижает риск загрязнения.Уникальная конструкция смеси буфера и ферментов позволяет использовать ее в одностадийной лиофилизированной системе.В наборе используется термостойкая обратная транскриптаза для эффективного синтеза первой цепи кДНК с использованием ДНК-полимеразы горячего старта Taq для количественной амплификации.Он содержит оптимизированный реакционный буфер, смесь ферментов и т. д., а также добавлены факторы, которые эффективно ингибируют неспецифическую амплификацию ПЦР и повышают эффективность амплификации нескольких реакций кПЦР, что позволяет проводить множественную количественную амплификацию флуоресценции, обеспечивая при этом эффективность амплификации праймеров.
Компоненты
| Имя |
| 1. Лио-буфер |
| 2. Лио-ферментная смесь |
| 3. Лиопротектор |
Условия перевозкиион
A: Лио-буфер и защитное средство: -25~-15℃, срок годности 1 год.
Б: Лио-ферментная смесь, 2-8 ℃, срок годности 6 месяцев.
Инструкция по эксплуатации
1. Реакционная система (в качестве примера возьмем 25 мкл)
| Компоненты | Объем (мкл) | Окончательная концентрация |
| Лио-буфер | 6 | 1* |
| Лио-ферментная смесь | 1 | - |
| Лио-протектор | 8 | - |
| Праймер-смесь (10 мкм) | 1 | 0,1- 1 мкм |
| Зондовая смесь (10 мкм) | 0,5 | 0,05-0,5 мкм |
| Шаблон РНК | 5 | - |
| ДЭПК H2O | До 25 | - |
2. Оптимизированный протокол езды на велосипеде
1) Стандартный протокол езды на велосипеде
| Стадия реакции | Температура | Время | Цикл | |
| 1 | Обратная транскрипция | 50°Сa | 10 минут | 1 |
| 2 | Начальная денатурация | 95°С | 5 мин | 1 |
| 3 | Реакция амплификации | 95°С | 15 секунд | 45 циклов |
| 60°Сb | 30 секундc |
2) Протокол быстрого цикла
|
| Стадия реакции | Температура | Время | Цикл |
| 1 | Обратная транскрипция | 50°Сa | 2мин | 1 |
| 2 | Начальная денатурация | 95°С | 2 секунды | 1 |
| 3 | Реакция амплификации | 95°С | 1 сек |
45 циклов |
| 60°Сb | 13 секундc |
Примечание:
a) Обеспечить регресс транскрипция: Температуру можно выбрать 42°C или 50°C в течение 10–15 минут.
b) Реакция амплификации: Температура регулируется в соответствии со значением Tm разработанных праймеров.
в)флуоресценция сигнал приобретение: Пожалуйста, установите процедуру эксперимента в соответствии с требованиямируководство по прибору.
Техническая информация/спецификации
| Горячий старт | Встроенный горячий старт. |
| Метод обнаружения | Обнаружение праймер-зонда |
| ПЦР-метод | Одношаговая RT-qPCR |
| Тип образца | РНК |
Примечания
1. Этот продукт предназначен только для исследовательского использования.
2. Для обеспечения вашего здоровья и безопасности надевайте необходимые средства индивидуальной защиты, такие как лабораторный халат и перчатки!
