Ультрануклеаза GMP-класса
Кат. номер: HC2016A
Ультрануклеаза GMP-класса экспрессируется и очищается в Escherichia coli (E.coli) методом генной инженерии и получена в условиях GMP.Он может снизить вязкость клеточного супернатанта и клеточного лизата в научных исследованиях, повысить эффективность очистки белка и улучшить функциональные исследования белка.Продукт также может восстанавливать остатки нуклеиновых кислот хозяина до уровня pg, улучшая эффективность и безопасность биологических продуктов, включая очистку вирусов, производство вакцин и фармацевтическое производство белков/полисахаридов.Кроме того, продукт также можно применять для предотвращения слипания мононуклеарных клеток периферической крови человека (РВМС) при клеточной терапии и разработке вакцин.
Ультрануклеаза поставляется в виде стерилизационного реагента, элюируемого в буфере (20 мМ Трис-HCL, pH 8,0, 2 мМ MgCl, 20 мМ NaCl, 50 % глицерина), при этом появляется бесцветная прозрачная жидкость.Этот продукт производится в соответствии с технологическими требованиями GMP и поставляется в жидкой форме.
Компоненты
Ультрануклеаза GMP-класса (250 ед/мкл)
Условия хранения
Продукт поставляется с сухим льдом и может храниться при температуре -25℃~-15°C в течение двух лет.
Если продукт открыт и хранился при температуре 4℃ более недели, мы рекомендуем фильтроватьпродукт для предотвращения микробного загрязнения.
Технические характеристики
| Хост выражения | Рекомбинантная кишечная палочка с геном ультрануклеазы |
| Молекулярная масса | 26,5 кДа |
| соэлектрическая точка | 6,85 |
| Чистота | ≥99% (SDS-СТР.) |
| Буфер хранения | 20 мМ трис-HCL, pH 8,0, 2 мМ MgCl, 20 мМ NaCl, 50% глицерин |
|
Определение единицы измерения | Определение одной единицы активности (Ед.) – это количество фермента, использованного дляизменить значение поглощения ΔA260 на 1,0 за 30 минут в 2,625 млреакционная система при 37 ℃ и pH 8,0 (что эквивалентно полному расщеплению37 мкг ДНК спермы лосося в олигонуклеотиды). |
инструкции
1. Образец Коллекция
Прикрепленные клетки: удалите среду, промойте клетки PBS и удалите супернатант.
Суспензионные клетки: собрать клетки центрифугированием, промыть клетки PBS, центрифугировать при 6000.об/мин в течение 10 мин, соберите осадок.
Escherichia coli: собрать бактерии центрифугированием, промыть один раз PBS, центрифугировать при 8000.об/мин в течение 5 мин и собирают осадок.
2. Обработка проб
Обработайте собранные клеточные осадки буфером для лизиса в соотношении массы (г) к объему (мл)1:(10-20) или механическими или химическими методами на льду или при комнатной температуре (1 г клеточного осадка содержит около
109 ячеек).
3. Ферментативная обработка
Добавьте 1-5 мМ MgCl в реакционную систему и доведите pH до 8-9.
Добавьте ультрануклеазу в соотношении 250 единиц, чтобы переварить 1 г клеточных осадка, инкубируйте при 37 ℃ более 30 минут.Пожалуйста, обратитесь к форме «Рекомендуемое время реакции», чтобы выбратьпродолжительность лечения.
4. Супернатант Коллекция
Центрифугируйте при 12 000 об/мин в течение 30 минут и соберите супернатант.
Примечание. Если раствор кислый или щелочной или содержит высокие концентрации соли, моющих средств илиденатурантов, пожалуйста, увеличьте дозировку фермента или соответственно увеличьте время лечения.
Рекомендуемые условия реакциионс
| Параметр | Оптимальное состояние | Эффективное состояние |
| Мг²+Концентрация | 1-5 мм | 1-10 мМ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Температура | 37℃ | 0-42℃ |
| Концентрация ДТТ | 0-100 мМ | >0 мм |
| Концентрация меркаптоэтанола | 0-100 мМ | >0 мм |
| Концентрация моновалентных катионов | 0-20 мм | 0-150 мМ |
| Концентрация фосфата | 0-10 мм | 0-100 мМ |
рекомендуемые Реакция Время (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Количество ультрануклеазы (конечная концентрация) | Время реакции |
| 0,25 Ед/мл | >10 часов |
| 2,5 Ед/мл | >4 часа |
| 25 Ед/мл | 30 минут |
Примечания:
Пожалуйста, надевайте необходимые средства индивидуальной защиты, такие как лабораторный халат и перчатки, чтобы обеспечить свое здоровье и безопасность!
