Рназа А
Рибонуклеаза А (РНКаза А) представляет собой одноцепочечный полипептид, содержащий 4 дисульфидные связи, с молекулярной массой около 13,7 кДа.РНКаза А представляет собой эндорибонуклеазу, которая специфически разрушает одноцепочечную РНК по остаткам C и U.В частности, расщепление распознает фосфодиэфирную связь, образованную 5'-рибозой нуклеотида и фосфатной группой на 3'-рибозе соседнего пиримидинового нуклеотида, так что 2,3'-циклические фосфаты гидролизуются до соответствующих 3'-рибозных нуклеотидов. нуклеозидфосфаты (например, pG-pG-pC-pA-pG расщепляется РНКазой А с образованием pG-pG-pCp и A-PG).РНКаза А наиболее активно расщепляет одноцепочечную РНК.Рекомендуемая рабочая концентрация 1–100 мкг/мл, совместимая с различными реакционными системами.Низкую концентрацию соли (0–100 мМ NaCl) можно использовать для разрезания одноцепочечной РНК, двухцепочечной РНК и цепей РНК, образующихся в результате гибридизации РНК-ДНК.
Однако при высокой концентрации соли (≥0,3 М) РНКаза А специфически расщепляет только одноцепочечную РНК.
РНКаза А чаще всего используется для удаления РНК во время получения плазмидной ДНК или геномной ДНК.Активна ли ДНКаза в процессе приготовления или нет, может легко повлиять на реакцию.Для инактивации активности ДНКазы можно использовать традиционный метод кипячения на водяной бане.Этот продукт не содержит ДНКазы и протеазы и не требует термической обработки перед использованием.Кроме того, этот продукт также можно использовать в экспериментах по молекулярной биологии, таких как анализ защиты от РНКазы и анализ последовательности РНК.
Условия хранения
Продукт следует хранить при температуре -25℃~- 15℃ в течение 2 лет.
Технические характеристики
| Появление | Пудра |
| Количество | 100мг/1г |
| Тип продукта | РНКаза А |
инструкции
Это один из распространенных методов приготовления раствора для хранения РНКазы А.Его также можно приготовитьдругими методами в соответствии с традиционными методами лабораторной или справочной литературы (например,непосредственно растворяясь в 10 мМ трис-HCl, pH 7,5 или растворе трис-NaCl)
1. Используйте 10 мМ ацетат натрия (рН 5,2) для приготовления раствора для хранения РНКазы А с концентрацией 10 мг/мл.
2. Нагревание при 100 ℃ в течение 15 мин.
3. Остудить до комнатной температуры, добавить 1/10 объема 1 М трис-HCl (рН 7,4), довести его рН до 7,4 (длянапример, добавьте 500 мл раствора для хранения РНКазы (1 М трис-HCl, pH 7,4) с концентрацией 10 мг/мл).
4. Расфасован при -20 ℃ для хранения в замороженном виде, который может храниться до 2 лет.
[Примечания]:
При кипячении раствора РНКазы А в нейтральных условиях образуется осадок РНКазы;Кипятите его при более низком pH, и если выпадает осадок, то можно наблюдать его, что может быть вызвано наличием белковых примесей.Если после кипячения обнаружен осадок, примеси можно удалить с помощью высокоскоростного центрифугирования (13 000 об/мин), а затем расфасовать для хранения в заморозке.
Примечания
Пожалуйста, надевайте необходимые средства индивидуальной защиты, такие как лабораторный халат и перчатки, чтобы обеспечить свое здоровье и безопасность.
