ДНКаза I (без РНКазы) (2 ед/мкл)
Кат. номер: HC4007B
ДНКаза I представляет собой эндонуклеазу, которая может расщеплять одно- или двухцепочечную ДНК.Он может гидролизовать фосфодиэфирные связи с образованием моно- и олигодезоксинуклеотидов, содержащих 5'-фосфатную группу и 3'-ОН-группу.Оптимальный рабочий диапазон pH ДНКазы I составляет 7–8.Активность ДНКазы I зависит от Са2+и может быть активирован ионами двухвалентных металлов, таких как CO2, Мн2+, Зн2+и т. д. В присутствии Mg2+ДНКаза I может произвольно расщепить любой участок двухцепочечной ДНК;В присутствии Mn2+ДНКаза I может расщеплять двухцепочечную ДНК в одном и том же сайте, образуя тупые или липкие концы с выступающими 1-2 нуклеотидами.Его можно использовать для обработки различных образцов РНК.
Компоненты
Имя | 1КУ | 5КУ |
Рекомбинантная ДНКаза I (без РНКазы) | 500 мкл | 5 ×500 мкл |
Реакционный буфер ДНКазы I (10 ×) | 1 мл | 5 × 1 мл |
Условия хранения
Этот продукт следует хранить при температуре -25~-15℃ в течение 2 лет.Пожалуйста, избегайте повторного замораживания-оттаивания.
инструкции
Применяется для удаления ДНК из образцов РНК только для справки.
1. Используйте центрифужные пробирки и наконечники для пипеток, не содержащие РНКазы, для приготовления следующей реакционной системы:
Компоненты | Объем (мкл) |
Реакционный буфер ДНКазы I (10 ×) | 1 |
Рекомбинантный ДНКазель (без РНКазы) | 1 |
РНК | X |
DDH без РНКазы2O | До 10 |
2. Условия реакции следующие: 37℃, через 15-30 минут добавить конечную концентрацию 2,5 мМ раствора ЭДТА и хорошо перемешать, затем 65℃ в течение 10 минут.Обработанный шаблон можно использовать для последующих экспериментов RT-PCR или RT-qPCR и т. д.
Примечания
1. ДНКаза l чувствительна к физической денатурации;При смешивании осторожно переворачивайте пробирку ихорошо встряхните, не трясите сильно.
2. При использовании фермент следует хранить в холодильнике или на ледяной бане, а также хранить при температуре -20 ℃ сразу после использования.
3. Этот продукт предназначен только для исследовательского использования.
4. В целях вашей безопасности работайте в лабораторных халатах и одноразовых перчатках.