Пероксидаза (источник хрена) Синоним: перекись водорода оксидоредуктаза;ПХР

Пероксидаза хрена (HRP) выделена из корней хрена (Amoracia Rusticana) и относится к ферропротопорфириновой группе пероксидаз.HRP легко соединяется с перекисью водорода (H2O2).Образующийся комплекс [HRP-H2O2] может окислять широкий спектр доноров водорода:
Донор + H2O2 → Окисленный донор + 2 H2O
HRP окисляет различные субстраты (см. Таблицу 1):
• Хромогенный
• Хемилюминесцентные (например, люминол или изолюминол)
• Флуорогенные (например, тирамин, гомованилиновая кислота или 4-гидроксифенилуксусная кислота)
HRP представляет собой одноцепочечный полипептид, содержащий четыре дисульфидных мостика.HRP представляет собой гликопротеин, содержащий 18% углеводов.Углеводный состав состоит из галактозы, арабинозы, ксилозы, фукозы, маннозы, маннозамина и галактозамина, в зависимости от конкретного изофермента.

HRP — это широко используемая метка для иммуноглобулинов во многих различных иммунохимических приложениях, включая иммуноблоттинг, иммуногистохимию и ELISA.HRP можно конъюгировать с антителами несколькими различными методами, включая глутаральдегид, окисление периодатом, через дисульфидные связи, а также через амино- и тиол-направленные сшивающие агенты.HRP является наиболее желательной меткой для антител, поскольку она является самой маленькой и наиболее стабильной из трех наиболее популярных ферментных меток (пероксидаза, β-галактозидаза, щелочная фосфатаза), а ее гликозилирование приводит к снижению неспецифического связывания.Опубликован обзор методов конъюгации глутаральдегида и периодата.

Пероксидаза также используется для определения глюкозы4 и пероксидов в растворах.В нескольких публикациях, диссертациях 6–24, 25–29 и диссертациях 30–46 упоминается использование P8375 в протоколах их исследований.