2×ПЦР Супер Микс (с красителем)
2× PCR Master Mix содержит ДНК-полимеразу Taq, dNTP и другие компоненты, необходимые для ПЦР.Мастер-микс стабилен в течение 3 месяцев при температуре 4 ℃ благодаря нашим индивидуальным стабилизаторам.Предварительная смесь оптимизирована для традиционной ПЦР и готова к использованию за счет добавления матрицы ДНК и праймеров.Продукты ПЦР можно загружать непосредственно для электрофореза с предварительно загруженным красителем бромфеноловым синим.Амплифицированные продукты содержат выступ 3'-dA и могут быть легко клонированы в Т-вектор.Мастер-микс 2×PCR упрощает процедуру ПЦР и снижает загрязнение.
Условия хранения
Продукты следует хранить при температуре -25℃~-15℃ в течение 2 лет.
Технические характеристики
Верность (по сравнению с Taq) | 1× |
Горячий старт | No |
Свес | 3'-А |
Полимераза | ДНК-полимераза Taq |
Формат реакции | СуперМикс или Мастер Микс |
Скорость реакции | Стандартный |
Тип продукта | Мастер-микс ПЦР (2 шт.) |
инструкции
1.Реакционная система
Компоненты | Объем(мкл) |
ДНК шаблона | Подходящий |
Праймер 1 (10 мкмоль/л) | 2 |
Праймер 2 (10 мкмоль/л) | 2 |
2× Мастер-микс ПЦР | 25 |
ддх2O | до 50 |
2.Протокол усиления
Шаги цикла | Температура (°С) | Время | Циклы |
Начальная денатурация | 94 | 5 мин | 1 |
Денатурация | 94 | 30 секунд | 35 |
Отжиг | 50-60 | 30 секунд | |
Расширение | 72 | 30-60 сек/кб | |
Окончательное продление | 72 | 10 минут | 1 |
Примечание:
1) Использование шаблона: 50-200 нг геномной ДНК;0,1-10 нг плазмидной ДНК.
2) Мг2+концентрация: Этот продукт содержит 3 мМ MgCl2, подходит для большинства реакций ПЦР.
3) Температура отжига: см. теоретическое значение Tm праймеров.Температуру отжига можно установить на 2–5 ℃ ниже теоретического значения грунтовки.
4) Время расширения: для молекулярной идентификации рекомендуется 30 сек/кб.Для клонирования генов рекомендуется 60 сек/кб.
Примечания
1.Продукты ПЦР с 2× PCR Master Mix не подходят для электрофореза в полиакриламидном геле.
2.Для вашей безопасности и здоровья при работе надевайте лабораторные халаты и одноразовые перчатки.
3.Он используется ТОЛЬКО для исследовательских целей!